Lhx4条件性敲除的夜盲症小鼠模型的基因型分析(2)

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1.4 视网膜疾病 9

第二章实验试剂及仪器 9

2.1 实验仪器 9

2.2 实验试剂 10

第三章实验方法 11

3.1小鼠的特性与实验规范 11

3.2 DNA采集与提取 12

3.3 引物设计 13

3.4 聚合酶链式反应（PCR） 16

3.5 琼脂糖凝胶电泳 18

3.6 小鼠解剖 18

第四章实验结果 19

4.1 琼脂糖凝胶电泳成像分析.. 19

第五章总结.20

参考文献 21

致谢 22

第一章引言

1.1背景介绍

1.1.1视网膜的意义

视觉功能是人体最重要的感觉功能之一，人从外界获取的信息有80%是通过眼睛来实现的。视力障碍从多方面影响人们的正常生活，随着环境、先进科技带来的生活习惯的变化，视力障碍人群逐年增多，其治疗也逐渐深入。视网膜病变是引起视力障碍重要原因。视网膜有许多遗传的或者后天获得的疾病，其中包括：青光眼、视网膜色素变性、黄斑病变、视网膜脱落、视网膜黄斑衰退症。因此了解视网膜、视神经的发育过程是治疗视网膜、视神经疾病的必要手段。哺乳动物的视网膜的主要细胞类型可能被发现；有50到100种。当不同的哺乳动物相比，这些类型多么相似令人惊讶。文献综述

小鼠和大鼠视网膜，都由视杆细胞为主，灵长类动物或松鼠都有一套相似的视锥双极细胞，由视锥细胞控制。单个神经元，如胆碱能无长突细胞，在不同的哺乳动物视网膜有惊人相似的形状和可能的功能。由于越来越多的突变小鼠，小鼠视网膜将成为研究突触和分子的哺乳动物的视网膜组织细节最重要的工具。小鼠视网膜在研究视网膜疾病也是一个很好的模型。在内层视网膜光感受器退化时会发生什么？它们可以通过视网膜移植使神经节细胞存活？什么样的视网膜功能可以被腺相关病毒载体的基因转移？然而，视网膜也将成为研究在中枢神经系统的结构功能关系的从优位置之一。视网膜的二维布局有利于多电极排列，研究不同类型的神经节细胞同时光反应中的应用。使用这种方法，有可能确定邻近的神经节细胞是否含有比单个细胞的脉冲排列的更多信息的同步化活动，或不同的神经节细胞类型如何反应相同的刺激。平安装视网膜也是成像实验的理想条件。视网膜只有200微米厚，透明的和精确的叠合为主，是一种理想的双光子显微镜。视网膜的精确贴合也是膜片钳记录视网膜的垂直切片的优势，因为它很容易在各个层中选择特定的细胞类型，并测定其光响应。视网膜电路阐明了不仅复杂的操作，如运动的计算，而且更简单的机制，如中心–环绕的对立，尚未了解。视网膜包括光照强度至少10对数单位惊人的范围，这完成通过适应和调制的多阶段。光转化导向串联，神经元的突触机制甚至形状（水平的细胞刺）都是模块化的相关的光依赖的机制。揭示了调制器的行为，如多巴胺，将帮助我们了解在视网膜的光适应，但是，更重要的是，将有助于我们理解大脑的其它部分的作用。我们知道，神经系统是在人体内起着主导作用的功能调节系统。而人体的结构与功能是十分复杂的，体内各器官与系统之间在功能和各种生理过程中并非独立自主地在进行生命活动的，它是在神经系统的直接或间接的调节、协调和控制下进行的，它们之间是彼此相互联系、影响并且密切配合的，从而使人体成为一个完整的生命有机体，用来维持人体正常的生命活动和其他各种活动。同时，人体又是生活在变化多端的环境中，而环境的变化必然时刻影响着体内的各种功能的不协调，这也需要神经系统对体内各种功能随时进行迅速而完善的调整，并使人体适应体内外环境的变化及时的对其进行调节作用。由此可见，神经系统在人体的生命活动中起着主导的地位，人类的神经系统高度发育，特别是大脑皮层，它不仅进化成为调节控制人体活动的最高级的神经中枢，而且同时进化成为能进行思维活动的器官。