1 材料和仪器
1.1 主要材料与试剂
废啤酒酵母泥,由江苏食品学院提供;NaOH,酒石酸钾钠,DNS试剂等。
1.2 主要仪器与设备
CW-2000型超声-微波协同萃取仪,中山大学与上海新拓微波溶样测试技术有限公司联合研制;722S型分光光度计,上海精密科学仪器有限公司制造;BCD-215KCN型冰箱,青岛海尔股份有限公司制造;TGL-16型台式高速冷冻离心机,北京长流科学仪器有限公司制造;HH-S型恒温水浴锅,金坛市亿通电子有限公司制造;TDL-5-A型低速大容量离心机,上海安亭科学仪器厂制造。
2 实验方法
2.1 废啤酒酵母泥的预处理
取100g啤酒酵母泥,加1000ml蒸馏水稀释,充分搅拌均匀,用筛孔尺寸为80目的筛子,除去酵母泥中的可见杂质。将酵母泥悬浮液在2000r/min下离心10min。取沉淀,加入体积分数5%的酒石酸溶液1000ml,搅拌均匀,静置30min脱苦、脱臭后[5]2000r/min下离心5min,即得预处理的啤酒酵母泥。为使用方便,将预处理后的酵母泥至于烘箱内60℃烘干至恒重,再以捣碎机捣碎为粉末备用。
2.2 葡萄糖标准曲线的制作[6]
(1)1mg/mL葡萄糖标准液
小烧杯取分析纯葡萄糖置于烘干箱中烘干至,于分析天平中准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖10mg,置于小烧杯中,加少量蒸馏水溶解后,转移到10mL容量瓶中,用蒸馏水定容至10mL,混匀,4℃冰箱中保存备用。
(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂
将6.3g DNS (分析天平中称取于小烧杯)和262mL 2M NaOH 溶液(大量筒称取250ml+小量筒称取12ml),加到500mL(量杯量取)含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中(在微波炉中加热1min溶解),再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至1000mL,贮于棕色瓶中备用。
(3)制作
取7支10mL具塞刻度试管编号,按表1分别加入浓度为1mg/mL的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。