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2.1 载体的构建
（1）pBIL2 35S GFP载体的构建
用BglⅡ和EcoRⅠ酶切pZA 35S GFP，用BamHⅠ和EcoRⅠ酶切质粒pBILoxp2，反应体系（100μl）如下：
pBILoxp2 40 pZA 35S GFP 20
BamHⅠ 2 BglⅡ 2.5
EcoRⅠ 2 EcoRⅠ 2.5
EcoRⅠButter 10 EcoRⅠ Butter 10
BSA 1 BSA 1
H2O 45 H2O 64
在37℃温浴3小时，用PCR产物纯化试剂盒进行纯化，最后用22μl的去离子水洗脱，加入2.5μl的T4 DNA连接酶buffer和0.5μl T4 DNA连接酶，22℃连接2～3小时，