2 材料和方法
2.1 供试材料
花粉供体材料:选用我国自主培育的冬性甘蓝型转bar基因抗草胺膦油菜“Z7B10”。
花粉受体材料:选用与“Z7B10”花期一致、异交结实率高的同类型普通油菜“中双10号”。
蜜蜂:选用我国特有的中华蜜蜂(Apis cerana cerana Fabricius)。
除草剂:选用拜耳公司生产的13.5%有效浓度的Basta水剂。
PCR引物碱基组成:35SF: CCTTCGCAAGACCCTTCCTC;BarR: AAACCCACGTCATGCCAGTT。
PCR反应体系:1U Taq酶,1× Buffer,2.2mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,0.15 mmol/L Primers,模板30ng;反应体积为20µl。
2.2 试验地点
以我国冬油菜主要产区江苏淮安(位于东经118°12′00″119°36′30″,北纬32°43′00″~34°06′00″之间,地处中国南北气候分界线,境内气候属于中纬度北亚热带向暖温带过渡气候,兼有南北气候特征)为试验地点。试验在淮阴师范学院“生物科技园”油菜隔离区进行(位于校园内),试验区四周建有围墙且墙外3公里内为城市居民区和商业区,能充分满足本研究所需的环境隔离条件。