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最近，研究者们相继研究了杂交链式反应、聚合酶链反应和酶循环放大等放大策略用在荧光反应方法中[11-21]。其中，切割酶作为酶的一种由于可以切割双螺旋DNA的一个片段，在DNA、RNA、细胞、金属离子和蛋白质检测中得到了广泛应用。利用酶辅助的信号放大，反应可以在常温条件下进行并且产物可以在溶液中快速的通过光学方法检测。然而，具我们所知，目前酶循环信号放大在双螺旋DNA的检测中还没有文献报道。
本论文，我们通过金纳米粒子对荧光团具有猝灭特性再结合酶循环信号放大，实现了双螺旋DNA的高灵敏检测。在最佳实验条件下，可以实现双螺旋DNA3.8pmol/L级的高灵敏检测。同时，我们的实验策略多双螺旋DNA具有很高的特异性识别功能。据我们所知，这是首次将酶循环放大策略用在双螺旋DNA的检测中，并且可以实现目标物在溶液中的直接检测。
1 材料与方法
1.1 实验试剂
寡聚脱氧核糖核苷酸由上海生工生物公司合成，序列如表1所示，精胺、磷酸三（2-氯已基）酯、三水合氯金酸、硝酸银和柠檬酸钠从阿拉丁试剂有限公司购买；实验所用水为超纯水由自己实验室制备。核酸切割酶从大连宝生物购买。实验所用缓冲溶液是10 mmol/L的PBS缓冲溶液（pH=7.0，含100 mmol/L NaCl）。其他试剂都是分析纯级别并通过正规渠道购买。