目前在科研及医疗层面鉴定犬细小病毒实验室方法有PCR、荧光定量PCR、HA-HI、免疫胶体金检测试纸和EMIEM观察,琼脂扩散实验,乳胶凝集实验等。而遗传进化分析理论依据主要是邻近法(Neighbor-joining),通过软件构建系统种系发生树来分析毒株的遗传进化特点和方向。
2.本研究的目的
本次研究旨在对采样得到的肛拭子样品进行分离鉴定,从分子水平上,科学地对分离所得的CPV-2的遗传进化情况进行系统性的分析,以此更加全面深刻地了解犬细小病毒的流行病学现状和发展,对今后研究CPV-2的基因突变提供参考价值,为预防和治疗犬细小病毒病的感染和流行贡献力量。
宠物医院采样学习
1.材料
培养液(含双抗的DMEM 1:1000)、医用棉签若干、2 ml EP管若干、病料袋若干、一次性EP手套若干、记号笔两支、病犬情况调查表一份、冰盒。
2.实验方法步骤
与院长取得联系,于2016年9月开始在博研宠物医院的马群以及麒麟门分院进行采样工作,到2016年学期结束。采样期间,发现有犬前来就诊就前往查看。得知其最近有呕吐、腹泻、发热等症状或者经实验室检查有疑似犬细小感染的结果,马上与主人沟通并进行肛拭子采样,并在病犬情况记录表上记录犬的品种、性别、年龄、免疫情况、体温以及其他特征性临床症状等数据。将肛拭子多余的一段折断后放入盛有培养液的EP管中,一个EP管放一个肛拭子并在EP管上做好标记,一只犬采集两个肛拭子,并将它们放入同一个塑料袋中,在袋子上标上与记录表上对应的序号,防止错乱,然后将塑料袋放入冰箱-20 ℃保存。并且每半个月用冰盒将采集好的病料从医院运送到实验室,进行保存或分离鉴定。