摘要水稻最为重要的粮食作物,一直被真菌病害稻瘟病所危害,严重影响其产量与经济效益。本研究以丽江新团黑谷和谷梅二号作为研究对象,用稻瘟菌粗毒素分别对两者的幼苗根部处理0h、6h、12h、24h和48h,对水稻苗地上部和地下部进行相关基因表达分析。结果表明,毒素处理后,与水杨酸和茉莉酸途径相关的8个基因与本底水平相比都表现出上调或下调的趋势,说明这2个途径都得到了表达。特别是PAL、JIOsPR10、PR1b和PR4表达量在48h时,在稻瘟病抗性品种谷梅二号的根或叶中的表达量远高于敏感品种丽江新团黑谷,说明这4个基因的表达在调节谷梅二号抗稻瘟菌毒素中具有重要作用。46964
Abstract The most important food crops of rice, has been compromised by rice blast fungal diseases, seriously affecting its production and economic benefits.. In the present research,Gumei 2 (resistant) and LijangXintuanHeigu (susceptible) was used to determine transcriptional level of rice defence genesof rice seedling under blast fungus toxin stress after 0h, 6h, 12h, 24h and 48h. The results showed that the gene expression of 8 genes related with salicylic acid (SA) and jasmonic acid (JA) pathway showed upward or downward trend compared with the background level, indicating that the two pathways have been expressed. Especially, the expression levels of PAL、JIOsPR10、PR1b and PR4 were higher in the resistant variety Gumei 2 than in the susceptible variety XintuanHeigu at 48h under the toxin treatment. The results suggested that the 4 genes play a considerable role in the regulation of Gumei 2 expressing resistance to blast fungus toxin stress.
毕业论文关键词:水稻;稻瘟病;抗性基因;定量PCR
Keyword: rice; rice blast; resistant genes; quantitative PCR
目 录
1 材料与方法 4
1.1 供试品种及水稻幼苗培养 4
1.2 水稻苗期稻瘟菌粗毒素处理 5
1.3 水稻RNA提取与荧光定量分析 5
1.3.1 RNA的提取 5
1.3.2 RNA逆转录- -聚合酶链式反应 7
1.3.3荧光定量分析 9
2 结果与分析 10
2.1实验数据整理 10
2.2水稻病害防卫相关基因的表现分析 17
3 讨论 18
致谢 21
水稻是重要的禾谷类粮食作物,全世界有近1/2的人口依赖水稻作为主要的卡路里来源[1]。因此水稻产量的稳定具有重要的社会价值和战略意义[2]。水稻作为重要的粮食产物,它的产量对我国的经济发展影响甚大。世界上近一半人口都以稻米为主食。水稻主要分布在亚洲和非洲的热带和亚热带地区。稻的栽培历史可追溯到约西元前12000~16000年。
稻瘟病是水稻上的一种毁灭性病害[3],几乎世界上栽培水稻的地区均有发生,每年给水稻造成11-30%的产量损失[4,5]。水稻病害每年都在掠夺相当部分的稻谷产量,稻瘟病近年来在我国各地就屡有大爆发,浙江省主要水稻种植地区在2010年当季也有大面积稻瘟病爆发,产量损失相当严重。
分生孢子萌发产生芽管,从伤口侵入或直接穿透侵入,引起发病。之后,病斑上产生新的分生孢子,进而反复侵染。根据水稻受害时期和部位的不同,可分为苗瘟、叶瘟、节瘟、穗颈瘟和谷粒瘟等[6]。
稻瘟病的发生受气候条件的影响较为显著,尤其以温度和湿度最为关键。25-28℃的较高温度且伴以高湿条件,适宜病菌分生孢子的形成、萌发和侵染,若高湿度结露持续一昼夜以上,则有利于病害的发生与流行。稻瘟菌以菌丝和分生孢子的形式在病稻草和病谷上越冬。当次年春天气温回升到20摄氏度左右时,若遇降雨,就会不断地产生分生孢子。阴雨连绵、昼夜温度差大、日照不足也有利于发病。