(4)按表1将反应物分别加入两个带盖的石英比色杯,来测定酶活力。
在1mL反应液中每分钟抑制连苯三酚自氧化速率达50﹪的酶量定义为一个酶活性单位。从加入连苯三酚开始计时,迅速摇匀,再倒入比色杯,采用752型分光光度计,在325nm波长下每隔30s读取反应液的OD值,持续读6min。
1.4.2.3.3 结果计算
酶活力={[(0.070-A325nm/min)/0.070]×100%}/50%×8mL×(8mL/15μL)
={[(0.070-A325nm/min)/0.070]×100%}/50%×284.4444
= [(0.070-A325nm/min)/0.070] ×568.8888
= (1- A325nm/min/0.070) ×568.8888
1.4.2.4 过氧化物酶(POD)活性的测定
1.4.2.4.1 试剂
(1)0.01mol/L PH7.0的磷酸缓冲液 (2)0.02mol/L的愈创木酚
(3)0.04mol/L的过氧化氢
1.4.2.4.2 操作步骤
(1)取材料0.1g,加少许石英砂,再分三次加PH 7.0的PBS,共计1mL。
(2)冰浴中充分研磨,4℃,12000r/m 离心15min。
(3)取上清液分别装于Eppendoff管中,于-20℃的冰箱中保存备用。
(4)取2个比色杯,按下表加入各种试剂。
表2 POD活力测定加样表
反应物 对照 样品
磷酸缓冲液 3.0mL 2.9mL
愈创木酚 0.05mL 0.05mL
酶液 - 0.1mL
(5)加好反应物摇匀,在样品管中加10μL 0.04mol•L-1过氧化氢溶液,即刻摇匀,在470nm处测OD值,读出第2分钟、第3分钟的OD值。
1.4.2.4.3 结果计算
OD3为第3分钟的OD值,OD2为第2分钟的OD值
2 结果与分析
2.1 复合菌肥对黄瓜种子出芽率的影响
表3 黄瓜种子的发芽率
处理 发芽率
对照 88%b
复合菌液 90%a
注:同行数据后小写字母表示在0.05水平上差异性显著,下同。
黄瓜种子经清水、复合菌液处理后,统计其发芽率,由表3可见,清水发芽率为88%,复合菌液发芽率为90%,复合菌液能够提高种子的发芽率,促进种子的萌发。
2.2 复合菌肥不同施用方法对黄瓜幼苗生长指标的影响
由表4可知,复合菌肥不同施肥方法对黄瓜幼苗的生长指标影响显著。采用浇灌法、叶面喷湿法、菌液发酵秸秆法处理黄瓜幼苗,黄瓜幼苗各项生长指标都显著高于总对照,菌液发酵秸秆法各项生长指标高于其对照组清水发酵秸秆法,采用叶面喷湿法,黄瓜的生长指标株高、叶面积达到最高,与总对照相比,分别增加了58.14%、60.00%。由此可见,复合菌肥不同施肥方法有利于黄瓜的生长,其中叶面喷湿法影响最为显著。
表4 复合菌肥不同施肥方法对黄瓜生长的影响
施肥方法 株高(mm) 叶面积(cm2)
浇灌法 65b 8.5c
叶面喷湿法 68a 12.8a
菌液发酵秸秆法 66b 8.8b
清水发酵秸秆法 57c 8.2d
总体对照组 43d 8.0e
2.3 复合菌肥不同施肥方法对黄瓜幼苗生理生化指标的影响
2.3.1 复合菌肥不同施肥方法对黄瓜幼苗根系活力的影响
根系活力泛指根系的吸收、合成、氧化和还原能力等,根系活力增加,植物吸收、合成代谢旺盛,有利于提高植物对逆境的适应性。根系活力能够较客观地反映根系生命活动。由图1可知,复合菌肥不同施肥方法对黄瓜幼苗的根系活力影响显著。采用浇灌法、叶面喷湿法、菌液发酵秸秆法处理黄瓜,各处理组与总对照相比根系活力分别提高15.73%、56.18%、31.46%,以叶面喷湿法提高最为显著,菌液发酵秸秆法次之。由此可见,复合菌肥不同施肥方法提高黄瓜幼苗的根系活力,其中叶面喷湿法最有利于黄瓜幼苗的根系活力的提高,增强了黄瓜对逆境的适应能力。
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