赭曲霉发酵生产壳聚糖培养条件优化(2)

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2.2.7 脱乙酰度测定 10

2.2.8 分子量测定 11

2.2.9 含量测定 12

2.2.10 DNS法测定还原糖 12

3 结果与分析 13

3.1 赭曲霉发酵生产壳聚糖培养时间优化结果 13

3.1.1 一级摇瓶发酵生长曲线 13

3.1.2 二级摇瓶发酵生长曲线 13

3.2 葡萄糖含量曲线 14

3.2.1 葡萄糖标准曲线 14

3.2.2 一级和二级发酵葡萄糖含量曲线 15

3.3 赭曲霉扩大培养 16

3.3.1 壳聚糖标准曲线 16

3.3.2 28小时扩大培养 17

3.3.3 38小时扩大培养 17

3.4 废弃赭曲霉提取 17

3.5 讨论 18

4 结论与展望 20

4.1 结论 20

4.2 展望 20

致谢 21

参考文献 22

1 绪论

1.1 赭曲霉介绍

赭曲霉（Aspergillus ochraceus），属于壳霉目，杯霉科，生长在温暖的地区，最适宜的生长温度是24℃到31℃，生长繁殖最适的水分活度为0.95-0.99。细胞壁分为三层：外层为无定形的β葡聚糖；中层是糖和蛋白质的结合物——糖蛋白；几丁质微纤维（甲壳素）位于细胞壁内层，夹杂着无定形蛋白质。有人研究利用赭曲霉制备心血管药物C11α羟基化坎利酮[1]，催化11α-羟基化反应[2]。

1.2 壳聚糖概述

1.2.1 壳聚糖性质和应用

（1）性质

甲克素是酰胺类多糖，它在节肢动物中的含量是最主要的，其中甲壳纲含甲壳素58%~85%。而在微生物中的甲壳素含量也是很可观的，在担子菌纲，子囊菌纲，半知菌纲及藻类纲等真菌细胞壁中的甲壳素含量为菌体干重的20%~22%，对甲克素进行水解就可以得到壳聚糖。壳聚糖，系统名为（1, 4）聚-2-氨基2-脱氧-β-D-葡聚糖，是脱乙酰甲壳质，是在自然界目前已知多糖中唯一的一种碱性同聚高分子多糖物质。壳聚糖颜色为白色或灰白色，略微带有珍珠光泽，并且呈现半透明状的固体，并且能溶于部分酸中，还可以进行O、N-酰化、含氧无机酸酯化、醚化、N-烷基化和氧化等化学反应[3]。一般地，N-乙酰基脱去55%及以上，即甲壳素的脱乙酰度在55%以上才可以被称为壳聚糖 [4]。

（2）应用

壳聚糖的应用非常多。比如低分子量的壳聚糖和它被降解后得到的物质对于抗菌、抗肿瘤、激活免疫和保湿都有着很显著地作用，所以应用在医疗领域的前景是非常广阔的。壳聚糖可以有效地增强巨噬细胞的吞噬功能和水解酶的活性，刺激巨噬细胞产生淋巴因子，启动免疫系统，同时不增加抗体的产生[5]。除此之外，用壳聚糖做成的0.11mm厚的无纺布还可以作为人造皮肤来使用，效果非常好[6]。对于壳聚糖在食品领域的应用得到了广泛的研究，作为食用膜，对于生态是无污染且可被生物降解，具有延长货架期、保鲜等方面的优点[7]。对于果汁的澄清和脱酸，壳聚糖是非常高效良好的，比如苹果汁`751[文"论'文]网www.751com.cn，壳聚糖含量为0.8千克/立方米的产品，浑浊度是0；对于葡萄汁脱酸，总酸含量基本可以减少52.6%[8]。在化妆品方面的应用也极其广泛，可用于制备发型固定剂、保护剂和柔软剂等。在材料研究领域，可利用超声乳化与改性壳聚糖磁性液体制备Fe3O4磁性纳米粒子的研究[9]。在生物工程领域：Van Griethuysen等用经戊二醛活化的表面涂有壳聚糖膜的硅凝胶颗粒固定乳糖酶，固定酶的相对活性可达50%[10]。除了上述的领域，壳聚糖在纺织、印染、水净化、农业上也都得到了极多的应用，就不一一赘述。