酵母多糖发酵条件的优化研究(6)

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1.2.2 多糖含量测量方法

1.2.2.1 化学法测定多糖含量

（1）苯酚-硫酸法

苯酚-浓硫酸法原理是浓硫酸将多糖水解成单糖并迅速脱水，生成的糠醛衍生物与苯酚缩合成有色化合物。以D-葡萄糖为标准品，然后用紫外分光光度计在约490nm处测定光吸收值并且通过与糖浓度的线性关系进行比较，进而对样品定量。

苯酚-硫酸比色法的优势是可以进行大量样品的测定，实验时可以不考虑蛋白质的影响，在2小时内颜色仍然稳定。杨春等指出苯酚暴露于空气中或在日光下被氧化逐渐变成粉红色，所以应该用棕色瓶子收集并且冷藏[9]。

（2）3,5-二硝基水杨酸法

3，5-二硝基水杨酸法具有操作简便、快速、灵敏度高杂质干扰较小等优点的测量多糖的方法。其原理为3，5-二硝基水杨酸与水解多糖，产物和还原糖共热反应后生成棕红色的氨基化合物，且还原糖的含量和溶液颜色浓度成正比关系，利用紫外分光光度计可测定多糖的含量。3，5-二硝基水杨酸法中，色素等还原性物质可与DNS显色剂显色，采用水解前测定值校正水解后测定值的方法，简便、有效地排除了色素等杂质的干扰[10]。