有关研究指出,在盐环境中, 盐离子在各种植物汲取矿物元素的时候, 会和其他各种离子互相角逐,从而使得矿物质营养受到胁迫, 随后而来的,就是影响植物的生长[4]。还有其他的报道称,在植物体内广泛存在着SOS盐敏感响应机制,通过细胞膜上的一系列响应,将细胞内的大量Na离子排除体外,从而调控体内平衡,对于植物抗盐的研究,在包括拟南芥,水稻等模式植物中报道较多,在包括胡杨,杨树,沙棘等盐土类植物中研究比较深入。甘薯作为主要的粮食作物,其种植面积广泛,土壤环境复杂,其抗盐机制研究层次较浅,仅仅局限于常规生理的研究,因此,通过本实验加深对甘薯的抗盐研究,具有较好的理论价值,为甘薯的遗传育种及农业生产实践提供较好的理论支持。
因此,植物在盐胁迫环境下离子的绝对量和动态变化能直接反应植物对盐胁迫的抗性,通过对离子的变化,能直接从根源研究甘薯的盐胁迫毒害机制,为研究甘薯的抗盐机制提供良好的支持。
基于以上分析,在盐胁迫情况下,植物对离子的吸收是植物抗盐的一个典型机制。本实验以甘薯为材料,比较了在盐处理的情况下,两种甘薯体内的各项离子的变化有什么区别,通过非损伤微测系统技术,对甘薯在抗盐过程中根系生理及离子H+、K+、Na+ 动态平衡的变化进行了初步研究,并以此为依据,探究甘薯的抗盐机制,以期在甘薯的遗传育种和农业生产实践中提供理论知识,为开展植物抗盐机理研究、选育培育耐盐植物新品种提供依据。
1.材 料 与 方 法
1.1供 试 材 料
1.1.1实 验 样 品
Xu22 Shi5两 种 甘 薯 品 种。
1.1.2实 验 样 品 的 选 取
从江苏 省徐州 市的甘 薯研究 所选取两个甘 薯品种,在田里挑长 势比较 好的并且基本一 致的两 种甘薯植株。
1.1.3 实 验 试 剂
标准脯氨酸溶液 酸性茚三酮试剂 磷酸缓冲液 盐酸羟胺 对氨基苯磺酸 亚硝酸钠 蒽酮试剂 丙酮试剂等。
1.1.4实 验 仪 器
pH测试计 气候箱 非损伤微测系统 紫外分光光度计等。
1.2实验方法
1.2.1培养幼苗
分别选择Xu22和Shi5两种甘薯幼苗,这些幼苗必须生长状况较好,而且生长状态也比较相似,品种幼苗各挑选16株,将它们放在培养箱中,培养2个星期。并且将标签贴上,对照组是每个品种的样本中的4瓶,在标签上对应分别写上xuCK,shiCK。
1.2.2脯氨酸含量的测定
1.2.2.1实验试剂
1、配制脯氨酸的标准溶液:取浓度为80%的乙醇100毫克,再取脯氨酸10毫克,将它们相溶配制出溶液,其浓度是100ug/ml。
2、配制酸性茚三酮试剂:取茚三酮2.5克,再取冰醋酸60毫升,取85%磷酸40毫升,其浓度是6mol/L,将它们都加入到烧杯中,给溶液加热,加热的温度条件为70℃,所配制出来的试剂将会在24小时内稳定。
1.2.2.2实验步骤
1、取甘薯地上部分0.3g,用3%磺基水杨酸3ml研磨提取,在沸水浴中处理样本提取液10分钟,然后等样本提取液冷却之后,将样本提取液加入离心管中,离心机的转速需要将它设置为3000转每分钟,然后再把离心管放入离心机当中去,离心10分钟,离心之后的上清液就是实验需要的待测液。
2、取1ml上清,加入1ml蒸馏水,在具有塞子的试管中加入1毫升冰醋酸+3毫升 2.5%酸性茚三酮,放在沸水浴中,让其显色,时间为1小时,等待其冷却,冷却之后再取2毫升的甲苯,将其加入到试剂中,并且盖好盖子,再将它放在漩涡混合仪器上,振荡,时间为半分钟,振荡结束后静置,等待其出现分层,分层之后,我们实验所需要的是红色的甲苯那一相,用胶头滴管将甲苯相吸取出来,然后在分光光度计中测量吸光度,条件是520nm。
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