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摘要本实验利用钠型732阳离子交换树脂和氯型717阴离子交换树脂（各2ml）的混合使用代替原磷酸氢二钾和盐酸组成缓冲溶液体系。先观察在不同试剂浓度下，大豆酶（大豆粉中）对于尿素的酶催化反应影响。再利用控制变量法和指示剂甲基橙，在保持尽量相同的实验条件下，观察两个不同的缓冲体系中，大豆酶对于尿素的酶催化反应影响。大量实验数据显示，在试剂组缓冲体系中，有大豆酶和无大豆酶组滴定体积差为9±1ml；在树脂组缓冲体系中，滴定体积差也为9±1ml。经过对酶活性的重复性验证，树脂组缓冲体系可以有效代替试剂组缓冲体系。36578
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毕业论文关键词：酶催化；PH值；缓冲体系；大豆酶
Study on the control of pH value enzyme catalytic reaction
Abstract
In the experiment, we use sodium type 732 cationic exchange resin and chlorine type 717 anion exchange resin (2ml) mixed using instead of original dipotassium hydrogen phosphate and hydrochloric acid buffer solution. Observe in different reagent concentration, soybean (soy flour) for enzyme catalyzed reaction of urea. Using control variable method and methyl orange indicator and keep as far as possible the same experimental conditions were observed in two different buffer systems, the effection soybean enzyme for urea in enzyme catalyzed reactions. According to a large number of experimental data, in group reagent buffer system, soybean enzyme and no soybean enzyme group titration volume difference 9±1 ml; In the resin group buffer system, titration volume difference for 9±1 ml.After the repeatability of the enzyme activity, the buffer system of the resin group can replace the reagent buffer system effectively.
Keyword: Enzyme catalysis; PH; Buffer system; Soybean enzyme
目录
1.绪论 5
1.1缓冲溶剂概述 5
1.2缓冲溶剂概念及理论体系 5
1.3缓冲溶剂的种类 8
1.4酶催化测试方法 10
1.5现有问题 12
1.6立题目的和意义 12
1.7研究内容 13
2. 实验部分 13
2.1实验药品 13
2.2实验方案 13
2.3实验仪器 13
2.3.1 101A-1型干燥箱 13
2.3.2离子交换柱 15
2.3.3 85-1A型磁力搅拌器 17
2.3.4 DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器 17
2.3.5自制实验用具 19
2.4 实验条件 19
2.5 大豆酶活性测定 19
2.6实验步骤 20
3. 结果与讨论 21
3.1试剂型缓冲体系 21
3.2树脂型缓冲体系 27
4. 结论 29
致 谢 30
参考文献 31
1.绪论
1.1缓冲溶剂概述
在目前的生物研究方面，缓冲溶液已经越来越受到行业内人士的重视。人体可以看成一台精密的仪器，其中的各种生化反应对pH值精度的要求非常严格。对pH值的控制主要是通过对氢离子浓度的调控来实现的，所以在生物体内有一套完整的天然缓冲系统。pH值的稳定是生物体内进行一系列生命活动的保证，体内pH浓度的改变体现在人体内与新陈代谢相联系的酸碱平衡变化，从而改变生物体内细胞的活性。通过对pH值进行精确控制，使得实验中的pH值与生物体体内的pH值保持一致，就可以在实验室中创建出与生物体内完全相同的pH值环境。同时，分离纯化和分析鉴定各种生化样品的实验也必须处于合适的pH值范围内，因此，我们需要对基本的缓冲溶液充分了解，可以根据实验要求和目的来选用和制备最恰当的缓冲溶液，因而可以准确的测定不同溶液的PH值就在生物化学的各种研究工作中和生物技术的各种开发工作中成了非常重要的基础实验工作。