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2.6 黑曲霉线粒体ROS的测定 17
3 讨论 19
4 致谢 20
参考文献 20
前言
紫苏(Perilla frutescens (L.) Britt.)是唇形科植物，具有特异芳香，主要产于江苏、湖南、湖北等长江以南等省，紫苏在全国20多个省（自治区、直辖市）广泛存在，是分布较广的自然资源[1]。紫苏属于药食两用植物，能促进消化液分泌，增强胃肠蠕动，调节中枢神经系统，清除自由基，增强免疫力，抗菌[2-3]，因为其利用价值高，所以关于紫苏的研究涉及食品、医疗保健、药品及化工等领域[4]。Morinaka Yoichi[5]等对36个紫苏鲜叶样品进行成分研究，从中分离鉴定出29个成分，其主要成分包括紫苏醛、紫苏酮、香薷酮、莳萝芹菜脑等。
本研究以紫苏醛为研究对象，紫苏醛是紫苏中的主要活性成分。早期，紫苏醛都是从紫叶紫苏中提取出来的，后来经研究者们探究发现，绿叶紫苏中也能够提取出紫苏醛，且含量比紫叶的高，随着工业产业的迅速发展，目前生产紫苏醛的方法主要是化学合成法和天然植物提取法[6]。关于紫苏醛抗菌性的研究不多，对紫苏及其提取物的研究有：紫苏提取物抑菌特性研究、紫苏叶中紫苏醛的提取及含量的测定，紫苏资源的开发及利用，紫苏的功能性成分及其产品开发等，紫苏醛在食品，医药，化工等领域都有广阔的发展前景，利用价值高，很多方面还有待开发。紫苏醛分子式为C10H14O,又被称为二氢枯茗醛或4-异丙烯基环己-1-烯-1-醛，是一种带有樱桃、油脂和枯茗似香气的光学活性萜类化合物，是天然紫苏油的特征香气成分，存在于天然紫苏油、莲叶桐和香柠檬油中[7]，无色或浅黄色，有特殊的香气，可用作香料，不溶于水，可溶于有机溶剂，紫苏叶中提取的紫苏醛还具有镇静活性的作用[8]。
黑曲霉 (Aspergillus niger )是自然界中常见的腐生真菌，其分生孢子头呈褐黑色放射状，分生孢子梗长短不一，双层小梗，多见于粮食、植物性产品和土壤中[9]。对培养要求不高，只要培养基中含有碳源、氮源及磷、钾、镁、硫等元素，提供适宜的温度，就能生长[10]。
黄曲霉(Aspergillus flavus)是一种常见的腐生真菌，菌落生长较快，结构疏松，表面呈灰绿色，菌体中包含许多复杂的分枝菌丝，多见于发霉的粮食、粮制品及其他霉腐的有机物上。黄曲霉的许多菌种会产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是一种有致癌性和剧烈毒性的化合物，是由真菌黄曲霉和寄生曲霉一起产生的次生代谢产物，具有强毒性，AFB1是目前发现的真菌类毒素中毒性最大、污染范围最广的毒素之一[11]。黄曲霉菌的孢子是一种过敏原[12]，黄曲霉菌具有耐热性，毒性极强。经前人研究表明，紫苏醛对黄曲霉和黑曲霉有抑菌作用，但是研究范围不广，本实验主要针对真菌的线粒体进行研究。
线粒体是细胞中的一个细胞器，是细胞内主要的ATP生产场所，在细胞凋亡、人的衰老、癌症、信号转导的发生过程中起着至关重要的作用[13]，是真核生物能量和代谢的中心，由双层膜构成的囊状结构，外模与内膜间的空腔称为外室，由内膜包围的腔称为内室或线粒体基质[14]。用线粒体特异的活细胞阳离子荧光探针获得的图像，显示线粒体是高度动态和形状会改变的细胞器[15]。
线粒体内膜通透性增加是凋亡信号转导的早期事件。线粒体内膜跨膜电位是用来反映线粒体内膜通透性的最佳指标之一[14]。线粒体膜电位（MMP）的测定，是亲脂性阳离子荧光染料结合到线粒体中，其荧光的增强或减弱说明线粒体内膜电负性的增高或降低。线粒体跨膜电位的稳定有利于文持细胞的正常生理功能，线粒体跨膜电位的降低是细胞凋亡早期的不可逆事件[17]。线粒体是多种促细胞凋亡信号转导分子的靶点，同时也是细胞死亡通路的整合元件，在一些因素作用下，线粒体及细胞发生一系列级联反应和变化，最终导致细胞凋亡[18]。