因此,通过测定超级稻水稻的各项光合参数,研究超级稻叶片光合特性和氮素吸收及利用机理,对于认识超级稻产量形成机制具有十分重要的作用,能够为改善超级稻栽培措施等提供理论依据,对科学栽培管理,提高产量和品质有着重要价值[29]。
本研究以超级杂交水稻品种两优084为供试材料,以常规水稻品种扬稻6号为对照,分别设置不同生长光照强度以及供氮浓度,测定并比较超级杂交水稻与常规品种水稻的光合生理特性,旨在探明不同光照强度及供氮浓度对不同品种水稻氮素吸收及分配的影响,阐明导致超级杂交水稻品种光能利用率产生差异的原因并,进一步研究其超高产的方法,为超级稻育种的选择和方向提供参考,为超水稻产量提升的进一步研究提供技术支撑和理论依据。
1材料与方法
1.1 植物材料与培养方式
本文所用超级杂交水稻品种“两优084”为供试材料,常规水稻品种“扬稻6号”为对照。种子经10%双氧水消毒浸泡后进行育苗。待幼苗生长至两叶一心时,选择长势相同的幼苗,将其移栽到周转箱中,每箱中移栽12株,每个周转箱的容积为6L[31]。先在中氮浓度供应的营养液中先预培养七天。七天之后,选择长势相同的水稻幼苗,分别供应高中低氮营养液,营养液中供氮浓度分别为:低氮20ppm;中氮40ppm;高氮100ppm,所用营养液配方采用国际水稻所(IRRI)常规营养液配方[30,31], 每隔三天更换一次营养液,并将营养液的pH值控制在5.45-5.55之间,集体操作具体操作为:每天用1M NaOH及1M HCl调节一次pH值,处理三十天后按照测定方法进行相关指标的测定[31]。
1.2 试验设计
试验于2017年在南京农业大学资源与环境科学学院温室试验基地进行,白天室内温度为28℃~35℃,光合有效副射为1000~1500μmolm-2s-1左右。主区为遮光处理和不遮光处理,副区为品种,分4次重复,每主区均分为两部分,一部分遮光,另外一部分不遮光。具体遮光处理操作方法为,在约2m高处的绳子上挂上定制的黑色塑料纱网,纱网所遮光强相当于自然光的80%。
1.3 测定项目与方法
1.3.1植株生物量的测定
将植株分为三部分:叶片、茎鞘和根系三个部分进行采样,于105℃杀青30分钟后,置于75℃烘箱中烘干至恒重,称量各个部分的重量[31]。
1.3.2叶面积的测定
叶面积的测定采用印相重量法进行测定[32],先假设所有叶片为均质,再用印相法测得单位干重新完全展开叶的叶片面积(SLA)
计算公式如下:
总叶片面积=SLA×总叶片干重
1.3.3光合速率的测定
使用Li-Cor 6400型光合作用测定仪普通叶室用于测定水稻叶片的各光合参数,测定时间为09:00-15:00。叶室内光照强度为1500 μmol m-2 s-1,CO2浓度为大气CO2浓度,约为400-420 μmol mol-1,空气湿度调节在40—50%,叶片温度控制在30°C左右。将新完全展开叶夹入叶室,等待约10min,数据显示稳定,记录数据。
1.3.4植株氮素含量的测定
将植株各部分样品烘干并粉碎后,准确称取0.05 g ,置于消煮管中,采用H2SO4 -H2O2方法于260-270℃高温消化,定容后,使用用流动分析仪(BRAN+LuEBBE)对消化液中的氮素含量进行,并计算植株氮浓度,最终结合地上部生物量可得到植株氮素积累量[31]。
地上部氮素浓度根据以下公式求得:
地上部氮浓度(mg•g-1)= 植株氮素积累量 / 地上部生物量
1.3.5硝态氮的测定
准确称取0.5g新完全展开叶植物鲜样置于研钵中,加入5ml去离子水,研磨成匀浆,转移至10 ml离心管中,置于沸水中煮20 min,15000 g离心10 min。取离心后上清液100 μL置于试管中,加入400μL 5%(w/v)的水杨酸–硫酸溶液,混匀后放于室温。20 min后缓慢加入9.5 ml 8%(w/v)氢氧化钠溶液,冷却至室温后,以空白作对照,在 410 nm 波长下测定吸光度,并根据标准曲线计算单位鲜重组织NO3--N含量。最后根据叶片的含水量换算为单位干重NO3--N的含量。
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