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因此本研究将探讨高温下不同温度敏感型品种在光合能力、光合产物相关物质相关酶活性的变化以及品种间的差异。本研究可为耐高温品种选育和棉花抗逆栽培提供借鉴。
1 材料与方法
1．1 实验设计
实验于2016年在江苏南京(118º50′E, 32º02′N, 长江流域下游棉区)南京农业大学牌楼试验站进行, 盆栽试验。供试棉花品种为高温敏感型品种苏棉15和高温弱敏感型PHY370WR，于2016年4月播种，三叶期时选择生长一致的壮苗移栽，每盆 1 株，共600盆。土壤含水量始终保持在土壤有效含水量的(70±5)%。在棉株3-4果枝第1-2果节开花时，挂牌标记当日所开白花以及棉铃对位叶。花后15d将生长一致的棉株移入人工气候室进行增温处理,对照处理温度为26℃(30/22℃)，处理温度为34℃(38/30℃)。高温处理5天后，取所标记的棉铃对位叶3-4片，取样时间为 8:00-9:00。将棉花叶片洗净擦干后，用干净的剪刀去除叶片样品的主脉和边缘，一半用液氮速冻后放置-80℃冰箱保存供测定酶活性用；另一半测定叶面积后，105℃杀青30分钟，70℃烘干至恒重后称干重计算比叶重并保存，以供测定物质含量。
1. 2 处理设置
试验利用人工气候室设置两个不同温度：高温处理(34℃[38/30℃]用HT表示)和对照处理(26℃[30/22℃]用CK表示)，温度控制模拟自然温度[如 26℃(30℃，22℃)设置温度控制循环为：2:00(24℃)-4:00(23℃)-6:00(22℃)-8:00(24℃)-10:00(27℃)-12:00(29℃)-14:00(30℃)-16:00(29℃)-18:00(28℃)-20:00(27℃)-22:00(27.5℃)-24:00(26℃)]，24 h连续运转，气候室光照模拟自然条件，6:00-20:00为有光照时间，其余时间为无光照时间。整个试验过程中棉花田间管理措施以高产栽培要求进行。
1．3 测定内容与方法
1. 3. 1 气体交换参数
选择生长均匀一致的棉花, 用美国产 Li-6400 型光合仪测定3株棉花倒四主茎叶净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、胞间CO2浓度(Ci)、蒸腾速率(Tr)。每次测定重复3次。测定时仪器使用开放式气路, 测定光源为内置光源, 光强为1500μmol s–1 m–2[4]。
1. 3. 2 叶绿素荧光参数
用PAM 2500调制式荧光仪(德国WAIZ公司)同期测定标记的棉株功能叶的叶绿素荧光参数[20]。
1. 3. 3 叶绿素
称取叶片鲜样0.1g，剪碎后放入25 ml容量瓶中,加入提取液(1:1）的无水乙醇和丙酮)定容后在25℃黑暗条件下提取24 h，测定提取液在663 nm和645 nm处的吸光值，Chl a、Chl b含量按照Arnon的公式计算[21]。