花粉萌发率检测从8月17至8月23日,共计4天。每天下午17:00-19:00采摘每个品种相同果节处即将开放的花蕾,带回实验室后室温过夜。第二天上午8:00左右待花蕾自然开放散粉后将花粉培养于30℃温度下,每个处理三次重复,之后在显微镜下统计不同培养温度下花粉萌发率。
花粉培养液配制:0.01%丝氨酸(W/V)、0.02%硼酸(W/V)0.01%谷氨酸(W/V)、0.07%硫酸锰(W/V)、0.01%脯氨酸(W/V)、0.01%赖氨酸(W/V)、40%蔗糖(W/V)、0.04%硝酸钙(W/V)、体积质量比配成100mL后4℃保存,使用前放置在室温。50μL培养液滴加于载玻片中央,轻轻拍打花朵使花粉分散于培养液上,数量100-300粒左右。然后在培养皿(直径9cm)底部垫三层滤纸,加10mL无菌水。将载玻片放入培养皿中,保鲜膜封口,保鲜膜扎3个孔,保持培养皿内70%-80%的湿度,之后将培养皿放入培养箱中培养(SPX-1000B-2,中国上海)3-4h。Microscope X S-215显微镜(视场:WF10×/18,物镜:10/0.25,160)10×10下观察,统计10个视野,每个样品统计200粒左右,花粉粒萌发标准为花粉管长度大于或等于花粉粒直径(图ⅠA、B)。花粉萌发率(%)=萌发花粉粒数/总花粉粒数×100%。
将做完了萌发率实验的花的花瓣及花萼去除,在体视镜下观察柱头突出情况,随后用镊子将雄蕊从花上剥离置于载玻片上,用体视镜观察花丝长度。
南京751合区每日气温数据来源于中国天气网每日发布信息。通过Excel制表作图,如图1。
1.2.3棉花叶片光响应曲线及光合速率测定
在15个棉花品种中选取3个品种,于8月中旬选择晴朗无云天气,751合试验地10:00-18:00用LI-6400型便携式光合系统分析仪(LI-CORInc.,Lincoln,Nebraska,USA)测定倒四叶净光合速率(Pn)等光合作用指标。采用LI-6400-02B自带红蓝光源(LED),设定光合测定仪有效光辐射强度(PAR)2500、2000、1500、1000和500µmol•m-2•s-1,叶室温度控制在29±0.5°C范围内,适应3-5min后测定陆地棉功能叶光合指标参数。每个品种三个重复,仪器测定值在相对误差大于5%时进行匹配。
1.2.4田间产量及考种性状调查
棉花收获后室内考种,以小区收获计产。采用Excel、SPSS作图及处理数据
2结果与分析
2.1日最高温变化规律
中国气象局规定日最高气温≥35℃的天气为高温天气。根据气象部门发布的每日温度的统计结果,6月26日(苗期Ⅰ)在经历温度的逐步升高后,最高温度达到29℃;随后温度再次震荡,于6月30日(苗期Ⅱ)达到最高温度为32℃的水平;7月18日(蕾期Ⅰ)在经过前一日的小幅上升后最高气温为32℃,且前一日至当天都是雷雨天气;7月22日(蕾期Ⅱ)在经过前两日的逐步上升,最高温度达到35℃;7月28日(蕾期Ⅲ)在持续两天高温后略有回落到最高气温为37℃的水平;最高气温再次逐步下降,到8月1日(花铃期Ⅰ)最高气温为35℃;8月5日(花铃期Ⅱ)经过气温的回落再上升,最高气温达到32℃;8月11日(花铃期Ⅲ)经过温度的逐步上升达到35℃的最高气温水平。
2.2不同生育期棉花叶片叶绿素荧光参数分析
2.2.1最小荧光强度Fo变化
FO是指当所有反应中心完全开放时的荧光,即暗适应后的最小荧光强度。由图2可见,苗期在三个生育期中数值水平相对最高,高温胁迫对蕾期和花铃期的影响不显著。蕾期Ⅰ的异常上升或与之前的雷雨天气有关。
综合三个生育期的表现,整体数值水平较低的品种有中棉所43号、新陆早60号和新陆早50号;整体数值水平较高的品种有新陆中42号、新陆早62号和中棉所41号。
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