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溶解性 易溶于水和乙醇,微溶于乙醚 * 溶于水(15%,21℃),不溶于乙醚,微溶于乙醇.
注:L-鸟氨酸一般以其盐酸盐形式作为试剂使用, 其盐酸盐易溶于水,不溶于乙醇,乙醚等。
L–精氨酸和L-鸟氨酸的结构式见附图2a,2b
2.2 茚三酮法检测氨基酸
茚三酮法可作为发酵液中L-Ornithine和L-Arginine的简单半定量分析方法。[7-8]
本课题中,采用薄层层析的方法将氨基酸分离检测,故选择将茚三酮配制成乙醇溶液,喷洒于硅胶板上,然后用吹风机加热吹干,由颜色深浅判断氨基酸含量。
2.3主要仪器
仪器 型号 厂家
高压灭菌锅 mLS-3020 日本三洋公司
精密
电子
天平 BS210S 北京赛多利斯天平有限公司
水平单向流工作台 SW-CJ-1B 苏净集团苏州安泰空气技术公司
电热恒温培养箱 MIR-162 日本三洋电器公司(SANYO)
水浴恒温振荡器 SHA-C 常州国华电器有限公司
超低温冰箱 MDF-192 日本三洋电器公司(SANYO)
高速冷冻离心机 CR21G 日本日立公司
超声波细胞破碎机 JY-96-Ⅱ 宁波新芝
生物
科技股份有限公司
冰箱 BCD-209SN 青岛海尔集团
紫外检测器 HD-21-2 上海青浦沪西仪器厂
紫外/可见分光光度仪 U-1800 昆明宝信捷生物应用设备有限公司
台式离心机 1-14 SIGMA公司
真空离心蒸发器 CVE-200 日本东京理化器械株式会社
超声波清洗机 As-3120 AUTOSCIENC
恒温水浴锅 HH-S 金坛市恒丰仪器厂
恒温磁力搅拌器 81-2型 上海司乐仪器厂
多用途漩涡混合器 SI-0256 Scientific Industries公司
3 薄层层析
3.1 薄层层析原理和特点
一般是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相(展开剂)在固定相流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样,不同氨基酸的展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率液不同,因此可以彼此分开。(即通过吸附-解析-再吸附-再解析的反复进行,而将样品各个组分分离开来)
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