自1975年问世以来,CME由于其独特的化学性能受到了电分析化学领域的广泛关注。现在,CME已成电分析化学领域热门研究方向,极大地推动了电化学和电分析化学的发展[10,11]。CME是在基底电极(如玻碳电极、金电极等)表面进行修饰剂分子的设计。它是将一些具有独特性质的分子、离子、聚合物等以薄膜的形式固定并组装在电极表面,以改变电极表面的性质[12]。CME由于修饰物的存在而具有某种预定的性质,如化学、物理、电化学性质等;以满足更多电分析和生物分析的要求,从而高选择性地进行人们所期望的反应。CME具有灵敏度高、选择性好、响应迅速等优点。目前,CME已经广泛应用于催化、分子识别、光电、分离与富集等领域[13]。在中国,董绍俊是开辟这一研究领域的先驱人物,他在1994年出版了系统介绍CME制备、表征及应用的专著,同时也对化学修饰电极的前景做了相应展望[14]。文献综述
胆碱(学名:2-羟乙基-三甲基氢氧化胆碱,Ch)可以促进人体某些内脏器官的脂肪代谢。Ch是机体合成乙酰胆碱的基础,从而影响神经信号的传递[15]。Ch也是维生素B的一种,对于动植物生命活动有其独特的作用,其分子式为HOCH2CH2N+(CH3)3Cl−包含-OH和-N+(CH3)3两个基团,其中的-OH使Ch能够共价键合到带有阳离子自由基的玻碳电极表面。此外,Ch含有带正电的-N+(CH3)3极性基团,可以显著增加电极表面的活性位点密度,从而有效催化UA的电化学氧化。本文将胆碱单分子层修饰在玻碳电极表面,从而得到了一种有效的化学修饰电极(Ch/GCE)。该修饰电极对UA的氧化过程具有显著的催化作用,可提高峰电流,并降低过电势。此外,Ch/GCE具有较宽的电位窗口、良好的稳定性和较强的抗干扰能力。在优化的实验条件下,Ch/GCE可应用于UA的电化学检测,线性范围是1~80 µmol/L。进一步的研究表明,该方法可应用于人体尿液中UA的含量检测,检测结果令人满意。
2 实验部分
2.1 试剂和溶液
尿酸购买于Sigma试剂有限公司(USA)。氯化胆碱(Ch)购自北京化学试剂厂,不同pH值(pH=3~9)的磷酸缓冲溶液(PBS;1/15mol/L)是由H3PO4,KH2PO4,Na2HPO4,KOH(国药集团化学有限公司)四种溶液按一定比例混合而成。所有试剂都未经过纯化处理。实验过程中的用水都是二次蒸馏水,且需要对所用二次蒸馏水通入氮气(N2)进行脱气处理。Ch溶液需要新制,并且溶解在10 mmol/L KCl溶液中。UA溶解在1/15 mol/L PBS溶液中,稀释到一定浓度,放在冰箱中备用。
2.2 仪器
电化学实验包括循环伏安法(CV)和微分脉冲伏安法(DPV)在CHI1230B电化学工作站(辰华仪器,上海,中国)上进行。三电极系统由玻碳工作电极(GCE)、铂丝对电极和Ag/AgCl参比电极组成。所有实验均在室温下操作,所有电解质溶液在实验之前均需充分脱氧,具体的操作是:通入氮气(N2)10分钟,实验过程中,电解质溶液保持在氮气气氛中。用KQ218超声清洗仪对电极进行超声清洗,EL104电子天平用于药品的称量。来!自~751论-文|网www.751com.cn
2.3 电极制备与修饰
在使用之前,对GCE进行了典型的处理,用直径为1.0,0.3和0.05 μm氧化铝粉末(Al2O3)依次抛光,然后分别在乙醇和蒸馏水中超声洗涤10分钟。洗净的电极在N2氛围中干燥以备进一步制备胆碱单分子层修饰电极(Ch/GCE),Ch/GCE是通过将洁净干燥的玻碳电极置于含有pH为7.0的1/15 mmol PBS缓冲溶液中进行循环伏安扫描,电位窗口为–1.70 V到+1.80 V,扫速为50 mV/s,扫描10圈制备。将修饰好的电极用二次蒸馏水冲洗、超声振荡3~5分钟,置于4 ℃的冰箱中贮存备用